تراریختی مینو و دارابی با واسطه آگروباکتریوم و باززایی ریزنمونه های بیان کننده ژن بتاگلوکورونیداز

نویسندگان
چکیده

تراریختی دو ژنوتیپ بومی مرکبات شامل مینو (minou, citrus sp.) و دارابی (citrus grandis) با واسطه آگروباکتریوم تومه فاشینس، در شرایط مناسبی که برای بسیاری از گونه های مرکبات معرفی شده است، انجام شد. تأثیر دو تیمار مختلف شامل مدت زمان هم کشتی (24، 72 و 120 ساعت) و غلظتهای متفاوت هورمون بنزیل آمینوپورین (2، 3 و 4 میلی گرم در لیتر)، که تأثیر زیادی بر روی میزان تراریختی و باززایی دارند، در یک مجموعه 50 تایی از جداکشتها بررسی گردید. ناحیه میان گره شاخه نهالهای 8–6 ماهه رشد یافته در گلخانه، به طول حدود 1 سانتیمتر بریده شده و به عنوان ریزنمونه برای تراریختی مورد استفاده قرار گرفت. جداکشتها به همراه سویه c58c1 (gv3850) آگروباکتریوم تومه فاشینس واجد پلاسمید pbi121 ، واجد ژن بتا گلوکورونیداز (uid a)، در محیط هم کشتی قرار گرفتند. هفتاد و دو ساعت هم کشتی در محیط غنی از هورمون bap (5 میلی گرم در لیتر) باعث افزایش تعداد سلولهای مستعد برای تراریختی در دو انتهای بریده شده و در نتیجه افزایش میزان تراریختی و باززایی گردید. بیان ژن بتا گالاکتورونیداز در ریزنمونه های تراریخت احتمالی با روش بیوشیمیایی و حضور آن با روش pcr بررسی شد. با به کارگیری شرایط بهینه، 8/34 درصد از ریزنمونه های مینو و 1/30 درصد از ریزنمونه های دارابی تراریخت شده، ژن گزارشگر β–گلوکورونیداز را بیان نمودند. پس از انتقال به محیط نوساقه، ریزنمونه های تراریخت رشد کرده و شاخه های 10–5 سانتیمتری قابل پیوند شدن ایجاد کردند. این اولین گزارش از تراریختی و باززایی ارقام بومی مرکبات ایران می باشد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

بهینه‌سازی بیان موقت ژن به واسطه آگروباکتریوم در بادام

از آنجاکه انتقال دایم ژن و تولید گیاه تراریخته به‌ویژه در گیاهان چند­ساله مانند بادام لازمه‌ی صرف وقت و هزینه است، بهینه‌سازی عوامل مختلف اثر گذار در تراریزش گیاهان، مورد توجه قرار می­گیرد. بیان موقت ژن با استفاده از اگروباکتریوم (اگرواینفیلتریشن) یک راهکار مفید برای بررسی عملکرد ژن در سیستم‌های بیانی متفاوت است. از آنجاکه بهینه­ کردن فاکتورهای مؤثر در روش‌های تراریزش لازمه برنامه‌های انتقال ژ...

متن کامل

تراریختی چغندر قند (Beta vulgaris L. ) با آگروباکتریوم ریزوژنز برای مطالعه بیان ژن در ریشه‌های مویین

در این تحقیق، با استفاده از آگروباکتریوم ریزوژنز، ریشه مویین چغندرقند تراریخته تولید گردید. در حین این مطالعه، تاثیر پروموتر جداسازی شده از آرابیدوپسیس تالیانا (پروموتر AT) که با پروموتر Hs1pro-1 ژن مقاومت به نماتد درچغندر مشابهت زیادی دارد، بر روی بیان ژن گزارشگر در مقایسه با پروموتر CaMV35S نیز مطالعه گردید. همچنین به عنوان کنترل منفی، ریشه‌های مویین با آگروباکتریوم ریزوژنز فاقد ناقل دوگا...

متن کامل

مقایسه تأثیر وضعیت طاق باز و دمر بر وضعیت تنفسی نوزادان نارس مبتلا به سندرم دیسترس تنفسی حاد تحت درمان با پروتکل Insure

کچ ی هد پ ی ش مز ی هن ه و فد : ساسا د مردنس رد نامرد ي سفنت سرتس ي ظنت نادازون داح ي سکا لدابت م ي و نژ د ي سکا ي د هدوب نبرک تسا طسوت هک کبس اـه ي ناـمرد ي فلتخم ي هلمجزا لکتورپ INSURE ماجنا م ي دوش ا اذل . ي هعلاطم ن فدهاب اقم ي هس عضو ي ت اه ي ندب ي عضو رب رمد و زاب قاط ي سفنت ت ي هـب لاتـبم سراـن نادازون ردنس د م ي سفنت سرتس ي لکتورپ اب نامرد تحت داح INSURE ماجنا درگ ...

متن کامل

بهینه سازی تراریختی در گیاه کلزا (B.napus L. ) با کنترل تولید گاز اتیلن وافزایش تدریجی عامل انتخاب کننده

کلزا (Brassica napus L.) یکی از مهمترین گیاهان روغنی جهان به شمار می رود. علی رغم تولید گیاهان تراریخته کلزا کارایی انتقال به این گیاه پایین می باشد. با توجه به اهمیت تاثیر ژنوتیپ گیاه و ترکیب محیط کشت بر تراریختی و باززایی و همچنین سمیت کانامایسین برای رشد این گیاه، توسعه یک روش مناسب جهت انتقال ژن بسیار ضروری است. در این پژوهش از ریزنمونه های برگهای لپه ای با استفاده از آگروباکتریوم تومی فا...

متن کامل

بهینه سازی بیان موقت ژن به واسطه آگروباکتریوم در بادام

از آنجاکه انتقال دایم ژن و تولید گیاه تراریخته به ویژه در گیاهان چند­ساله مانند بادام لازمه ی صرف وقت و هزینه است، بهینه سازی عوامل مختلف اثر گذار در تراریزش گیاهان، مورد توجه قرار می­گیرد. بیان موقت ژن با استفاده از اگروباکتریوم (اگرواینفیلتریشن) یک راهکار مفید برای بررسی عملکرد ژن در سیستم های بیانی متفاوت است. از آنجاکه بهینه­ کردن فاکتورهای مؤثر در روش های تراریزش لازمه برنامه های انتقال ژن...

متن کامل

تراریختی چغندر قند (beta vulgaris l. ) با آگروباکتریوم ریزوژنز برای مطالعه بیان ژن در ریشه های مویین

در این تحقیق، با استفاده از آگروباکتریوم ریزوژنز، ریشه مویین چغندرقند تراریخته تولید گردید. در حین این مطالعه، تاثیر پروموتر جداسازی شده از آرابیدوپسیس تالیانا (پروموتر at) که با پروموتر hs1pro-1 ژن مقاومت به نماتد درچغندر مشابهت زیادی دارد، بر روی بیان ژن گزارشگر در مقایسه با پروموتر camv35s نیز مطالعه گردید. همچنین به عنوان کنترل منفی، ریشه های مویین با آگروباکتریوم ریزوژنز فاقد ناقل دوگانه ا...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
زیست شناسی ایران

جلد ۲۴، شماره ۳، صفحات ۳۴۲-۳۵۴

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023